返回首页 在线留言 联系我们

产品搜索 更多

产品目录

联系方式

上海古朵生物科技有限公司
联系人:俞燕熙
手机:15000565797
电话:021-58999639
传真:021-50760790
地址:上海嘉定区
邮编:201805
邮箱:m13310162040@163.com
首页 > 技术支持 > 小鼠干细胞病毒(MSCV)感染实验步骤

技术支持

小鼠干细胞病毒(MSCV)感染实验步骤

发布时间:2016-12-21   点击次数:699次

    小鼠干细胞病毒(MSCV)感染实验步骤
     注:本公司产品仅用于科研实验!  上海古朵ELISA试剂盒

 

    材料与试剂
    1.小鼠
    2.抗CD3与抗CD28抗体(Biolegend,100302,102102)
    3.白细胞介素-2(IL-2)(R&Dsystems402-ML-020)
    4.聚凝胺(Polybrene)(hexadimethrinebromide,SIGMAH9268)
    5.RPMI-1640培养基(GIBCO,11875-093)
    6.FBS(GEMBIO900-108)
    7.青霉素/链霉素溶液(GIBCO15140-122)
    8.(Invitrogen21985-023)
    9.PBS溶液(1XPhosphateBufferedSaline,GIBCO10010-023)
    10.小鼠干细胞病毒MSCV(Clontech634401)

 

    实验步骤
    1.用抗CD3与抗CD28抗体包被24孔板guoye。
    向24孔板每孔加入400μlPBS含有1μg/ml抗CD3抗体和0.5μg/ml抗CD28抗体。在盖子或封口上封上封口膜,保持在4℃黑暗guoye。第二天,吸除去抗体,每孔加入400μlRPMI-1640培养基,不要让板干燥。
    2.杀死小鼠并将CD4+CD44loCD62Lhi幼稚T细胞分类。
    3.24孔板PRMI-1640培养基中每孔播撒5×106细胞,培养细胞guoye。
    4.按1:2比例分配细胞(把一个孔的细胞分成两孔),加入IL-2至终浓度50U/ml,培养6h(37°C,5%CO2)。
    5.1200RPM旋转板5min(室温),吸除培养基,并加入1ml含有适量MSCV颗粒的RPMI-1640(病毒浓度取决于多于106cfu/ml的titter)以及5-10μg/ml3。聚凝胺。2500RPM旋转板90min(37°C)。
    6.除去上清液,加入RPMI-1640培养基供分化或增殖。

分享到:

返回列表 | 返回顶部
上一篇 : 国产elisa试剂盒的结构介绍    下一篇 :  鱼神经肽Y(NPY)ELISA检测试剂盒使用说明书
网站首页 公司简介 产品中心 应用案例 技术支持 企业动态 联系我们
上海古朵生物科技有限公司 版权所有 总访问量:181067
电话:021-58999639 传真:021-50760790 地址:上海嘉定区
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备19048203号-1
联系人:俞燕熙
电话:
021-58999639
手机:
15000565797
点击这里给我发消息