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技术支持

人ELISA检测试剂盒说明书

发布时间:2017-07-17   点击次数:2162次

上海古朵生物科技专业提供ELISA试剂盒人ELISA检测试剂盒说明书,价格,规格,型号,用途,性能等资讯,本司专业经营进口/国产ELISA试剂盒,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,培养基,抗体,动物血清,标准品对照品,化学试剂,实验耗材,为客户提供免费代测ELISA试剂盒服务,一周内出结果,咨询!

 

中文名:人ELISA试剂盒

别名:人ELISA Kit

英文名:Human ELISA Kit

货号:fk-m0097

供应商:上海古朵

规格:48t/96t

保存:2-8℃

有效期:6个月

范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。

特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。

引起ELISA测定错误结果的原因主要有:

①标本因素;

②试剂因素;

③操作因素。

人ELISA检测试剂盒说明书

ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒液体类标本:

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5)组织标本:

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。


人ELISA检测试剂盒严格注明:

1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。


ELISA试剂盒,人ELISA检测试剂盒说明书性能:

1.灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2.特异性:不与其它细胞因子反应。

3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

结果判断与分析:

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的ICAM-1/CD54标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的ICAM-1/CD54含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-80ng/ml

4、敏感度:0.1ng/ml

EILSA试剂盒说明书

ELISA试剂盒,操作步骤:

1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案:

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

 

ELISA试剂盒,注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计3算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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