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技术支持

人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒说明书

更新时间:2017-08-14   点击次数:3260次

人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒说明书由上海远慕生物提供,本司专业经营进口/国产ELISA试剂盒,动物血清,培养基,抗体,实验耗材,化学试剂,标准品对照品酶联免疫试剂盒白介素试剂盒,金标检测试剂盒,提供elisa试剂盒代测服务,ELISA种属涵盖大鼠,人,小鼠,植物,马,鱼,鸭,鸡,兔,猪,犬,骆驼,牛及其他动物,咨询!

中文名:人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒

别名:人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA Kit

供应商:上海远慕

保存条件:2-8℃

有效期:6个月

试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。

产品特点:是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检。

可检测指标:炎症因子,血管生成素,趋化因子,生长因子等。

人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒说明书

ELISA试剂盒试剂准备:

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。




人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA检测试剂盒组织结构:

1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心23分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。

5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒说明书 若干特点:

专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。

样品易保存:经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。


人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒操作步骤:

1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

2、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。

7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA检测试剂盒

注意事项:

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。


ELISA试剂盒实验洗板方法:

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。


试剂盒性能:

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2. 灵敏度:zui低检测浓度小于(参考说明书)

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。




 

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