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技术支持

内毒素鲎实验,如何消除样品干扰?
发布时间:2019-10-08   点击次数:114次

在鲎试剂检验内毒素试验中有些样品严重干扰鲎试验生化反应,甚至使反应不能进行。这就需要采用特殊方法对样品进 行预处理。

1 稀释法

相当大一部分样品的干扰因素在一定浓度下才起作用,把样品适量稀释后即可按常规方法测定。如甘露醇、庆大霉素、人血白蛋白、肝素钠和维生素 C 等注射液等。

2 加热法

有些干扰因素为不耐热的物质,将样品在适当温度下保温一段时间,即可按常规方法测 定。如某些血液制品和生物药品等。

3 调整 pH 值法

有些样品 PH 值偏高或偏低,且鲎试剂中 pH 缓冲剂不能将反应液调整至正常范围。这时 可用预先处理并已确认无菌无热原的盐酸或氢氧化钠液调整样品液 pH。然后按常规方法测 定, 如氨基酸注射液。

4 超滤─反冲法

一般中草药注射液成份复杂,干扰因素较多,难以用普通方法加以消除,即可用超滤法。

取样品适量,进行超滤,样品药液全部压滤通过滤膜,内毒素被阻滤在超滤膜片上,再取少 量无热原水冲洗滤器、滤膜。卸开滤器,将超滤膜反向放置滤器上,严密固定。再用无热原 水将内毒素从超滤膜上冲至一量瓶中,精密加水至刻度。冲洗液按常规方法测定。

5 固体样品 

若固体样品为可溶性物质,用无热原水溶解,按上述方法进行干扰样品试验。

手术器械、一次性输液器等固体物品的内毒素测定,用适量无热原水按规定方法浸泡或冲洗即可。内毒素的水溶性较大,器具内表面或外表面的内毒素经适当时间、适当温度浸泡 或冲洗,即可溶入液体,按常规方法测定。

对于复杂样品还需将上述各法联合应用。但不管单独用其一法,或二法、三法联用,在 操作过程中均有可能出现抑制或增敏等干扰作用,使测定浓度高于或低于实际浓度,这时必 须做回收率实验,并根据测得的回收率求算内毒素。

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