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技术支持

血清实验遇到这些问题应淡定

更新时间:2019-12-16   点击次数:986次

当实验新手使用血清时遇到这些问题应“淡定”处理:

1. 怎样去除沉淀物?

技术解答:若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

 

2. 我的FBS部分解冻,该怎么办?

技术解答:让血清*解冻,轻轻旋转血清瓶, 然后重新冷冻血清。血清质量不会受到影响。

 

3. 怎样热灭活血清?

技术解答:血清热灭活是在水浴56度,保持30分钟, 水位应该高于血清水位。在热灭活过程中,温度的调节,通过监控含同样体积的水的参照瓶里的水温进行调节。在热灭活过程必须旋转瓶子每5 分钟混合一次,确保受热均匀。使用的温度计必须经过校准!

 

加热可以灭活补体系统,激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。

    

如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊,污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化。

那么黑点的出现可能是因为:

·配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长。

·血清质量不好,反复冻融的结果。

·培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。

·细胞生长过老,破碎的细胞残骸。

·配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点。

好的血清才能让实验更加成功,结果更加,所以选择一个好的血清对您的实验来说是非常有必要的。

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