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技术支持

应对菌落蔓延,TTC的使用方法!

发布时间:2021-07-30   点击次数:161次

关于TTC的使用,从刚开始的菌落蔓延,搜索解决办法,了解TTC之后琢磨使用剂量,可以说是花了一段不短的时间。包括对于TTC的使用,也可以说“众说纷纭",好了,废话说到这,进入正题:

首先,TTC有毒,不仅毒细菌也毒人,所以使用的时候要小心(其实用别的化学试剂也要小心,不好意思,又说废话了)。接着是配置的0.5%的TTC溶液,你们可以根据个人的需要配置不同浓度。

配置方法:实验室用水(我们用的桶装纯净水)200mL,TTC粉末1.00 g,水不用灭菌,稍微加热(大概40℃水温这样就完全溶解了),也可以搅拌至完全溶解,然后倒入棕色瓶子,放无菌室静置大概72小时(放置72小时,不确定24小时或者48小时行不行),此时配置出来的溶液加入空白培养基是养不成菌落的(我觉得这也说明了这东西有毒)。没必要先把水灭菌,也没必要加入PDA培养基里一起121℃灭菌。

使用剂量:一般是500mL PDA培养基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液,在无菌室里操作,在倒平板之前加,摇晃均匀就可以,对解决菌落蔓延问题非常有效,而且也不会有明显的抑制细菌生长导致实验不准确的情况。

温馨提醒:放置条件:避光低温保存。

小结
目的 : 为便于区别样品颗粒与菌落,可在每 100mL 琼脂培养基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液,如有细菌存在,培养后菌落呈红色。
配制 : TTC 0.5g,蒸馏水 100mL,溶解。定性滤纸过滤,滤液置于棕色瓶中,4°C冰箱冷藏 。
灭菌 : 配好的0.5% TTC,  过滤除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按预计使用量分装入小管,115℃高压灭菌 20min 、121度高温灭菌15min,过后4°C冰箱冷藏。
使用 : 临浇平板前,再按前述比例将TTC与培养基混合摇匀。

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