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技术支持

深低温保藏细胞的解冻方法!

更新时间:2021-08-12   点击次数:1609次

  深低温保藏的细胞十分脆弱,要轻柔操作。快速解冻深低温保藏的细胞,然后直接将其接种到*生长培养基中,如果细胞对抗冻剂(DMSO或甘油)特别敏感,则离心除去抗冻剂,然后将细胞接种到*生长培养基中。下面是深低温保藏细胞的建议解冻步骤:

  直接接种法

  1.从冻存管中取出细胞,用37℃水浴快速解冻。

  2.将细胞直接接种到*生长培养基中。每毫升冻存细胞需要10-20ml*生长培养基。计算活细胞的个数。细胞接种量至少要达到3X105 活细胞/ml。

  3.将细胞培养12-24h。更换新鲜*生长培养基以去除抗冻剂。

  离心法

  1.从冻存管中取出细胞,用37℃水浴快速解冻。

  2.将1-2ml 冻存细胞接种到大约25ml*生长培养基中。要非常轻柔地进行混合。

  3.用大约80 X g的速度离心2-3分钟。

  4.吸除上清液。

  5.用*生长培养基轻轻重悬解离下来的细胞,并计算活细胞的个数。

  6.接种细胞。细胞接种量至少要达到3X105 活细胞/ml。

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