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金标免疫层析法与荧光免疫层析法有何区别

发布时间:2022-01-13   点击次数:350次

酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。

就是用酶标记抗原或抗体,抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色),颜色的深浅与抗原或抗体的量成正比。

金标法也是标记免疫的方法之一,用来作标记物的是胶体金(氯金酸在还原剂的作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称为胶体金。)分为层析法和斑点渗透法。

以层析法为例:层析法一般采用双抗原夹心法免疫测定原理,选择经纯化的基因工程制备的抗原,分别作为包被抗原和胶体金结合抗原。当待检标本中含有HIV抗体时,先和金标记抗原结合,由于层析作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动,当遇到包被抗原时,形成Ag-Ab-Ag-Au复合物富集在包被线上,形成红色沉淀线。在包被膜上还有一条质控线对照,故当有两条红线时判为阳性,只有一条红线时,判为阴性。

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