返回首页 在线留言 联系我们

产品搜索 更多

产品目录

联系方式

上海远慕生物科技有限公司
联系人:俞燕熙
手机:15000565797
电话:021-58999639
传真:021-50760790
地址:上海嘉定区
邮编:201805
邮箱:m13310162040@163.com
首页 > 技术支持 > 如何选择western-blot中分离胶的浓度

技术支持

如何选择western-blot中分离胶的浓度

发布时间:2022-09-26   点击次数:135次

western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白而因为western blot的膜应该是*覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量

如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2(不太确定)的地方,对于分子量比较小的蛋白,当然是胶的浓度越大,分离效果越好.但是你必须考虑到,胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径,分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果.如果孔径太大,所有蛋白都跑得那么快,也是分不开的.

所以,关键是看这个分子量附近的蛋白,比如±5kD以内的所有蛋白,在不同浓度的胶中的速度差要尽可能达到最大,假设是对数正态分布,那么方差要足够大,才会有较好的分离效果.另一方面,蛋白跑的路程越大,也越能和附近的蛋白分开.

建议:溴酚蓝跑到底,而目标蛋白正好在整块胶的1/2的地方,分离的效果时最/好的。

分享到:

返回列表 | 返回顶部
上一篇 : 关于血清分离胶你了解多少呢?    下一篇 :  脂类和类脂你还在傻傻分不清吗
网站首页 公司简介 产品中心 应用案例 技术支持 企业动态 联系我们
上海远慕生物科技有限公司 版权所有 总访问量:514712
电话:021-58999639 传真:021-50760790 地址:上海嘉定区
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备14029423号-3
联系人:俞燕熙
电话:
021-58999639
手机:
15000565797
点击这里给我发消息