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技术支持

浅析细菌不染色标本检查法

发布时间:2022-11-25   点击次数:214次

不染色标本一般用于观察细菌动力及运动情况,因为不染色标本直接在普通光学显微镜下,不能清楚看到细菌的形态与结构特征。细菌未染色时无色透明,在显微镜下主要靠细菌的折射率与周围环境不同进行观察。有鞭毛的细菌在镜下呈活泼有方向的运动,无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。常用的方法有压滴法、悬滴法。

1、实验材料
(1)菌种变形杆菌6—12h肉汤培养物、葡萄球菌6—12h肉汤培养物。
(2)玻片普通玻片、凹玻片、盖玻片。
(3)其他吸管、酒精灯、接种环、凡士林等。

2、实验方法
(1)悬滴法
①取2张洁净凹玻片,在凹窝四周涂少许凡士林。
②用接种环各取!环变形杆菌、葡萄球菌培养物分别置于两片盖玻片中央。
③将凹玻片倒合于盖玻片上,使凹窝中央正对菌液。
④迅速翻转载玻片,用小镊子轻压,使盖玻片与凹窝边缘粘紧封闭,以防水分蒸发。
⑤先用低倍镜找到悬滴边缘,再换高倍镜,观察时应下降聚光器,缩小光圈,减少光亮,使背景较暗易于观察。

(2)压滴法
①用接种环取2—3环菌液置于洁净载玻片中央。
②用小镊子夹1块盖玻片轻轻覆盖在菌液上,放置盖玻片时应注意,先将盖玻片的一端接触菌液,缓缓放下。以免产生气泡。
③先用低倍镜观察,找到细菌所在部位后再换高倍镜观察,看细菌能否运动。

3、实验结果
变形杆菌有鞭毛,运动活泼,可向不同方向迅速运动。葡萄球菌无鞭毛,不能做真正运动,只能在一定范围内做位移不大的颤动,这是受水分子撞击而呈分子运动(布朗运动)。
检查细菌动力时需注意区分真正运动和分子运动,前者是由于细菌鞭毛引起的有方向性的位移。而后者是因水分子撞击细菌而引起的布朗运动,只在原地颤动,无鞭毛的细菌仅有此种分子运动。另外,需注意标本片制好后应尽快观察,以免水分蒸发影响观察结果。

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