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技术支持

紫外可见分光光度计使用中常见问题

发布时间:2022-12-06   点击次数:211次

  分光光度计是实验室里最/常用的一种理化分析仪器,本文就分光光度计在使用过程中出现的几个常见问题,如仪器的预热、波长准确度的检查与校正、吸收池的使用方法、吸光度测定重复性等问题进行分析,并提出解决这些问题的适宜方法。

  紫外可见分光光度计是分析测试实验室里常见的一种分 析仪器,用于测定被测物质在一定波长照射下所产生的吸光 度的大小,从而实现对物质进行定性或定量分析。在平时的日常教学及到企业调研时,发现在分光光度计使用问题上,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不规范的问题,下面就常见的一些问题进行讨论。

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  1 关于仪器的预热问题
  在一般分光光度计的使用说明书上,要求仪器预热时间约20分钟;若是带微处理器的分光光度计,开机后仪器自动进入自检 (初始化 )状态,约需1O分钟左右。在分光光度计预热这个环节上,很多使用者或多或少存在问题,如开机只预热电路系统 (不调节波长、打开吸收池暗箱盖预热等)或认为初始化过程就是预热等等。
  对带微处理器有自检功能的分光光度计,开机后仪器自检 (初始化)结束后,在测定窗口上,设置所需波长值, 用一个吸收池装上纯净水置于光路上,调 “0000A"后,预热 仪器,当仪器显示读数不再变化后即可进行测定。
  对于紫外可见分光光度计,由于有双光源 (钨灯与氘灯), 为了延长灯的使用寿命,开机自检完成后可以关掉测定时不用的光源灯。

  2 关于波长准确度的检查与校正
  日常在使用分光光度计时,是否要经常进行仪器波长准确度的检查 ?答案是否定的。当在日常测定中发现仪器测定灵敏度下降,这时才应进行波长准确度的检查,最简易的检查方法 (粗检 )是:仪器开机后,调节波长为 580nm,在吸收池座的通光道中插入一张白色卡片纸,若能观察到一长方形 的黄色光斑,说明波长准确度属正常范围,否则就应进行波 长校正。

  当仪器经过长途搬运、受过机械振动或更换光源灯泡后, 必须进行波长准确度的检查与校正。粗检同上,其校正方法 有:干涉滤光片或镨钕滤光片校正法、利用氘灯的特征发射线校正法。具体步骤可参考仪器使用说明书。

  3 关于吸收池的使用问题
  按照吸收池使用的基本顺序分说如下:
  (1)吸收池的润洗
  吸收池装液前必须用待装溶液润洗 2~3遍,润洗前是否 要用纯水先润洗一遍呢?这可看具体情况区别对待。
  如果初次用干的吸收池装待测液 (特别是有色溶液)时, 从维护保养吸收池的角度讲,为减小其干玻面对颜色的吸附能力,便于用后吸收池的清洗,建议先用纯水润洗一遍,再用待装溶液润洗 2~3遍;若后再用此吸收池装浓度相近或更高浓度的溶液 (如从小到大测定标准系列溶液的吸光度)时, 可直接用待装溶液润洗2~3遍即可。
  标准曲线法定量时,如果是先测定标准系列溶液的吸光度,当测到样品溶液时,由于测定的样品溶液浓度比最后一 个标准溶液的浓度低或不可知时,建议先用纯水润洗一遍, 再用待装溶液润洗 2~3遍。
  (2)吸收池的装液、擦拭与放置 吸收池润洗完成后注入待测溶液至池高的 2/3~3/4处。
  (3)吸收池成套性检验及处理 新吸收池或吸收池使用一段时间后都必须进行成套性检验.

  4 关于吸光度测定重复性的问题
  分光光度计在测定过程中,发现同一个溶液在不同时问里其测定结果不同,即重复性不好,其原因是什么?排除测定错误因素外,可 能原因有:
  (1)仪器预热时间不够或预热方法不对所造成,应延长预热时间或采用正确的预热方法。
  (2)光电转换器 (如光电管)因长时间使用其光电转换 效率发生了变化导致。这时标准溶液与待测溶液的吸光度都 同样变低,在相对定量时对结果影响很小。但是对这类仪器, 一 般建议连续使用时间不应超过 3h,若需长时间使用,最好间歇 30min 。

  5 其他问题
  (1)发现测定过程中的一些不良操作不利于仪器的维护、保养,使用者应尽 可能避免。如在仪器的上方进行操作(如倒溶液);拿出来的吸收池 (或吸收池架)放在仪器的面 板上;同实验室不同仪器的吸收池混用等。
  (2)关于防尘、防潮问题
  仪器一般都随机附有一只塑料布罩,不使用时用其罩住整个仪器,这是很好的防尘手段。但发现很多实验室里不用附来塑料布罩,而是 自己用一块普通布或做成布罩来覆盖仪 器,防尘效果不如塑料布罩理想。另外,在塑料布罩只放入数袋防潮硅胶,也能更好起到延长防潮的功效。在防潮时, 如果仪器设有防潮干燥筒的,应经常检查,发现变色立即更 换新的或加以烘干再用。
  长期停用的分光光度计,要定期开机除潮,如每隔一个 月通电预热半小时,以保持整机呈干燥状态,并且维持电子元件的性能 。


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