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技术支持

叶绿体色素的提取和分离实验

更新时间:2023-09-12   点击次数:355次

原理

叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质,主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用丙酮提取。分离色素的方法有多种,纸层析是其中最jian简便的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时,由于混合物中各成分在两相(即流动相和固定相)间具有不同的分配系数,它们的移动速度不同,使样品中的混合物得到分离。

仪器药品

大试管 台天平

研钵 量筒

烧杯 漏斗

软木塞 新华滤纸

丙酮 四氯化碳

无水硫酸钠 碳酸钙

石英砂

操作步骤

1.称取新鲜叶子2g,放入研钵中加丙酮5ml,少许碳酸钙和石英砂,研磨成匀浆,再加丙酮5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。

2.取准备好的滤纸条(2×20cm),将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。

3.用毛细管取叶绿素溶液点于窄条的上方,注意一次所点溶液不可过多,如色素过淡,用电吹风吹干后再点1梍2次。

4.在大试管中加入四氯化碳3梍5ml及少许无水硫酸钠。然后将滤纸条固定于软木塞上,插入试管内,使窄端浸入溶剂中(色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰到试管壁),盖紧软木塞,直立于阴暗处进行层析。经过0.5─1小时后,观察分离后色素带的分布。最上端橙黄色为胡萝卜素,其次黄色为叶黄素,再下面蓝绿色为叶绿素a,最后的黄绿色为叶绿素b。

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