人抗内皮细胞抗体（AECA）ELISA分析检测试剂盒
- 型 号：
- 价 格：18
上海远慕生物专业讲述人抗内皮细胞抗体（AECA）ELISA分析检测试剂盒的用途，操作说明书，价格，品牌，特点等资讯，中文名：人抗内皮细胞抗体（AECA）ELISA试剂盒，别名：人抗内皮细胞抗体（AECA）ELISA Kit，特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性！
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒详细介绍：
上海远慕生物专业提供人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA分析检测试剂盒的用途，操作说明书，价格，品牌，特点等资讯，各种种属不同的进口/国产ELISA试剂盒，产品规格分为96T(孔)、48T(孔)，培养基，抗体，动物血清，标准品，化学试剂，货期短，质量优，同时我们为您提供ELISA试剂盒价格、用途、货号、规格、说明书、等相关资讯，详情可致电我司销售人员！
【中文名】人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒
【英文名】Human anti-endothelial cell antibody,AECA ELISA Kit
【别名】人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit
【供应商】上海远慕
【规格】48T/96T
【产品保存】2-8℃
【有效期】6个月
【销售优势】量大从优、质量保证。
【产品特点】敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
【产品用途】用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
【检测种属】大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
【常见ELISA试剂盒】白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA检测试剂盒原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
标本的处理：
（1）细胞培养上清液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。
（2）脑脊液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。
（3）血浆
①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液46倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书方法检测。
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA分析检测试剂盒组成及试剂配制：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA分析检测试剂盒操作步骤：
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
ELISA试剂盒样品的采集和存储：
血清-使用血清分离管，使样品在室温下或凝块一夜之间两个小时
在大约1000×4oC G.测定新鲜制备的血清离心20分钟
立即或存放样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免反复冻融循环。
血浆采集血浆用EDTA或肝素作为抗凝剂。15分钟，离心样品
1000×G在2到8摄氏度范围内采集30分钟。去除血浆和即刻检测或者储存样品
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit细胞裂解液裂解细胞之前，必须根据以下方向的测定。
1。贴壁细胞应分离胰蛋白酶和离心后收集（悬浮细胞将离心收集直接）。
2。洗细胞三次冷PBS。
3。悬浮细胞在PBS（1×）和细胞受超声处理4次（或≤冷冻细胞-20°C。用温和的混融细胞。3次重复冻结/解冻周期。）
4。在1500×g离心10分钟在2到8摄氏度去除细胞碎片。细胞培养上清和其他生物液体在1000×g离心20分钟去除样品颗粒和即刻检测或者商店样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免重复冻结/解冻循环。
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA检测试剂盒组织结构：
1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心12分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。
5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒适用领域：
1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位
2.研究抗酶抗体的合成
3.显现微量的免疫沉淀反应
4.定量检测体液中抗原或抗体成份
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA Kit技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。
试剂盒准备：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
