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人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒注意事项

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人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒注意事项由上海远慕生物详细介绍,中文名:人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒,别名:人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA Kit,适用范围:仅供科研使用,不得用于临床,标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

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中文名:人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒

别名:人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA kit

供应商:上海远慕

规格:48t/96t

保存:2-8℃

有效期:6个月

适用范围:仅供科研使用,不得用于临床

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本,例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

Elisa试剂盒安全性:

  1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

  2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

  3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

  4.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

  5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

  6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

  7.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒注意事项

 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒组成:

  1.30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ;

  2.酶标试剂 6ml×1 瓶;

  3.酶标包被板 12 孔×8 条 ;

  4.样品稀释液 6ml×1 瓶

  5.显色剂A 液 6ml×1 瓶 ;

  6.显色剂B 液 6ml×1/瓶;

  7.终止液 6ml×1 瓶;

  8.标准品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶;

  9.标准品稀释液 1.5ml×1 瓶;

  10.说明书 1 份;

  11.封板膜 2 张;

  12. 密封袋 1 个;

 

 人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒若干特点:

  专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

  灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。

  样品易保存:经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。

 

  人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒注意事项 液体类标本:

  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

  1)血清:

  室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  2)血浆:

  应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  3)尿液:

  用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

  4)细胞培养上清:

  检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  5)组织标本:

  切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

 

  人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA检测试剂盒操作步骤:

  1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

  2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。

  3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

  4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。

  5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。

  6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。

  7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

  8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。

  9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒操作步骤

人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒注意事项:

  1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

  2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

  3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

  4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

  5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

  6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

  7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

  8)加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

  9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

  人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA检测试剂盒组织结构:

  1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心23分钟将血红细胞迅速小心地分离。

  2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

  3、 细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

  4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。

  5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

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