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大鼠丙二醛(MDA)ELISA检测试剂盒操作步骤

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大鼠丙二醛(MDA)ELISA检测试剂盒操作步骤详细介绍!用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。供应商:上海古朵生物,检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

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上海古朵生物详细讲述大鼠丙二醛(MDA)ELISA检测试剂盒操作步骤,实验原理,用途,特点,说明书,规格,品牌,价格等资讯,本司专业销售进口/国产ELISA试剂盒,标准品,化学试剂,动物血清,培养基,抗体,实验耗材,染色液,科研试剂,提供ELISA试剂盒免费代测服务,一周内出结果,ELISA种属涵盖广,!

 

中文名:大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒
别名:大鼠丙二醛(MDA)ELISA Kit
供应商:上海古朵
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
范围:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒:白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本。

大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒说明书

大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒组成及试剂配制:
1:预包被板: 96T/48T
2:酶标记抗体: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3:标准品: -6 0.5mL x 2
4:EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5:标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6:显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7:终止液: 1N 12mL x 1

 

大鼠丙二醛(MDA)ELISA检测试剂盒操作步骤注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.保用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。

 

大鼠丙二醛(MDA)ELISA检测试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列数据在小试管中进行稀释。
20nmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
10nmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
5nmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2.5nmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.25nmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

 

大鼠丙二醛(MDA)ELISA试剂盒组织结构:
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


 
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犬外皮蛋白(IVL)ELISA试剂盒
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