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人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒说明书

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人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒说明书详细介绍!供应商:上海古朵生物,规格:48t/96t,保质期:6个月,使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。性能:敏感性高,特异性强,重复性。

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上海古朵生物科技是家专业从事科研试剂的优质厂家,详细为您介绍人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒说明书,价格,用途,特点,适用范围,品牌,型号等资讯,专业销售进口/国产ELISA试剂盒,细胞株,微生物,抗生素,抗原,标准品对照品,化学试剂,动物血清,缓冲液,实验耗材,培养基,抗体,生物分子,其他科研试剂,提供ELISA试剂盒免费代测服务,ELISA种属成千上万,订购!

 

 

中文名:人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒
别名:人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA kit
供应商:上海古朵
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。
用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
性能:敏感性高,特异性强,重复性。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒说明书

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒主要特点:
专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
样品易保存:经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。

 

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
标本的处理:
(1)细胞培养上清液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。
(2)脑脊液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。
(3)血浆
①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液126倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测,按照说明书指定方法检测。

 

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒说明书注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

 

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

 

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒适用领域:
1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位
2.研究抗酶抗体的合成
3.显现微量的免疫沉淀反应
4.定量检测体液中抗原或抗体成份


人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA检测试剂盒说明书操作步骤:
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入detection ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加hrp conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(od值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

 

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒基本原理:
①抗原或抗体能吸附到固相载体表面,并保持其免疫学活性;
②抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,仍保持其免疫学和酶学活性;
③酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。

 

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