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人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书

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人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书详细介绍!中文名:人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒,别名:人β羟丁酸(β-OHB)ELISA Kit,规格:48t/96t,保存:2~8℃,特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

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中文名:人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒

别名:人β羟丁酸(β-OHB)ELISA Kit

供应商:上海古朵

规格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6个月

样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。

检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

<strong><strong>人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书</strong></strong>

人β羟丁酸(β-OHB)ELISA检测试剂盒体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

 

人β羟丁酸(β-OHB)ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书技术原理:
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

 

人β羟丁酸(β-OHB)ELISA检测试剂盒操作步骤:

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。


人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书注意事项:

1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

3.保用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7.加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8.按照试剂盒标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

 

人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒操作说明书部分相关试剂盒如下:

人补体片断4b(C4b)ELISA试剂盒

人5羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒

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