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质粒中量提取试剂盒说明书

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质粒中量提取试剂盒说明书详细介绍:名称:质粒中量提取试剂盒品牌:Omega供应商:上海古朵英文名/型号:Plasmid Midi Kit(2)英文名/型号:Plasmid Midi Kit(10)英文名/型号:Plasmid Midi Kit(25)英文名/型号:Plasmid Midi Kit(100)用途:从15-50ml细菌培养液中纯化200-250ug高纯度的质粒DNA.

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质粒中量提取试剂盒说明书详细介绍:

名称:质粒中量提取试剂盒

品牌:Omega

供应商:上海古朵

英文名/型号:Plasmid Midi Kit(2)

英文名/型号:Plasmid Midi Kit(10)

英文名/型号:Plasmid Midi Kit(25)

英文名/型号:Plasmid Midi Kit(100)

用途:从15-50ml细菌培养液中纯化200-250ug高纯度的质粒DNA

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质粒中量提取试剂盒特点:

1.不需要使用有毒的苯酚,lvfang等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从50-70 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取150μg -600μg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。

2.获得的质粒产量高,浓度高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

3.内毒素含量极低(< 0.1 EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。

 

该试剂盒采用经典的SDS碱裂解法和中量硅胶柱纯化方式,适合于从25-50ml培养过夜的细菌培养液中纯化高达250µg质粒DNA。纯化的质粒可直接用于自动测序、酶切、转录等各种用途。质粒的产量依赖于质粒的拷贝数、E.coli 菌株以及生长条件,一般30ml携带高拷贝质粒的E.coli LB过夜培养液可以纯化出100-250µg质粒DNA,对于低拷贝菌株一次操作量可以高达100ml。

 

 

质粒中量提取试剂盒注意事项:

1.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。

2.提取大质粒时操作动作要轻柔,应该使用剪大了开口的吸头,防止机械剪切对DNA的损坏。

3.DNA沉淀液沉淀离心后,可能看不到明显沉淀。如未见沉淀,担心DNA丢失,可保留上清液,待完成全部操作后电泳鉴定,以确定是否获得终产物(数百微克DNA离心沉淀在管的侧壁上,可能无法看到明显团块)。

4.得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。

5.质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道确切大小。

6.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

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