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过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)

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中文名:过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法),供应商:上海古朵,规格:100T,分类:氧化检测,保存:4℃,避光,12个月,用途:定量检测血清、血浆、组织、细胞等样品中的过氧化氢酶(CAT)活性。产品说明:采用紫外分光光度计检测,操作简便,检测240nm处吸光度值,进行定量计算。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

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上海古朵生物详细为您介绍过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)相关的优点,用途,注意事项,操作步骤等详情,本司专业销售总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT核黄素比色法),氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法),还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法),其他系列检测试剂盒,ELISA试剂盒,动物血清血浆,标准品对照品,培养基,抗体,抗生素,蛋白质,维生素,化学试剂,生化试剂,生物分子,微生物,实验耗材,其他实验试剂等,品种齐全,价格实惠,有进口,国产系列之分,订购!

 

 

中文名:过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)

供应商:上海古朵

规格:100T

分类:氧化检测

保存:4℃,避光,12个月

用途:定量检测血清、血浆、组织、细胞等样品中的过氧化氢酶(CAT)活性。

产品说明:采用紫外分光光度计检测,操作简便,检测240nm处吸光度值,进行定量计算。

适用范围:该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)操作步骤(仅供参考):

1、配制CATAssaybuffer工作液:按CATAssaybuffer(2.5×):蒸馏水=1.5:1的比例 稀释,即获得CATAssaybuffer工作液,4℃预冷,待用。

2、配制100mMH2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用CATAssaybuffer工作液稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。

3、准备样品:
1_x0001_ 细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP细胞裂解液。如为植物样品或动物组织样品可按下列步骤操作。

a、取植物样品0.4-0.5g或动物组织样品,加入预冷的CATAssaybuffer工作液2ml,研磨匀浆,转移至15ml离心管。再用CATAssaybuffer工作液冲洗研磨器,合并冲洗液至该离心管,补加CATAssaybuffer工作液至10ml刻度。

b、混匀,4℃冰箱中静置10min,转移离心管上部的清液至新的离心管中,

c、4500g离心15min,上清液即为过氧化氢酶提取液。-70℃冻存,用于CAT的检测。

2_x0001_ 血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10 倍稀释后,可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,亦可4℃短期保存,用于CAT的检测。

3_x0001_ 高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CATAssay buffer工作液稀释。

4_x0001_ (选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度, 以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。

4.CAT检测:按照下表设置空白管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生 气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测需要设置平行复测管。

5.加入100mMH2O2基液,每加完一管立即计时,并迅速倒入石英比色皿中,在240nm下测定吸光度,每隔1min读数1次,共测4次,待全部测定完毕后,计算酶活力。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

 

 

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)注意事项:

1.待测样品中不能含有CAT抑制剂,同时需避免反复冻融。

2.CATAssaybuffer如果出现浑浊或絮状物,应弃用。

3.完整的红细胞以及未稀释的溶血液中的过氧化氢酶置于4℃一周仍然很稳定,稀释后 的溶血液中CAT容易失活。

4.尽量避免冰冻样品造成溶血,否则过氧化氢酶活性会下降10%-15%。

5.血清样品室温下3天内活性下降64.7%,4℃下下降10.5%,-20℃保存30天活性仅 下降3.5%。因此,待测样品均应-20℃或-70℃保存。

6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒检测原理:

是血清或血浆等样品H2O2 在240nm处有强烈吸收,过氧化氢酶能分解过H2O2,使待测溶液吸光度随反应时间而减少,通过紫外分光光度计检测240nm处吸光度,根据测定吸光度的变化速度即可测出过氧化氢酶的活性。紫外法又称紫外分光光度计发或紫外吸收法,该酶的检测对于研究植物代谢强度及抗旱、抗病能力有一定的价值。

 

 

过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(紫外法)优点如下:
1、操作简便:单试剂操作,全程约20分钟,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效,呈色稳定好.  
3、再现性好:批内CV=2.3%,批间CV=5.34%。
4、回收试验: X =98%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。

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