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总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)

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中文名:总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法),供应商:上海古朵生物,规格:100T/50T,分类:氧化检测,保存:—20℃,避光,6个月,用途:检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。说明:比色法,显色底物与GSH反应,生成黄色化合物,分光光度法检测410nm处吸光度,进而计算出总谷胱甘肽(T-GSH)含量。

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总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)简介

 

中文名:总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)

供应商:上海古朵

规格:100T/50T

分类:氧化检测

保存:—20℃,避光,6个月

用途:检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。

说明:比色法,显色底物与GSH反应,生成黄色化合物,分光光度法检测410nm处吸光度,进而计算出总谷胱甘肽(T-GSH)含量。

适用范围:本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 

<strong>总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)</strong>简介

上海古朵长期现货供应细胞培养,液体试剂,化学试剂,生化试剂,ELISA试剂盒,金标检测试剂盒,动物血清,标准品对照品,抗生素,维生素,溶液,染色液,缓冲液,蛋白质,细胞株,培养基,抗体,实验耗材,其他实验试剂等,了解更多试剂请来电我司销售人员!

 

 

总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)介绍:

谷胱甘肽(glutathione,GSH)存在于几乎身体的每一个细胞,参与细胞许多功能活动,是一种氧自由基消除剂。还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成,能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG),其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。

 

 

总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)操作步骤:

1、 配制GSH标准储存液:取10mg还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH2O,溶 解并混匀,即为还原型GSH标准储存液(10mM)。一部分立即使用,其余适当分装后-20℃保存。  

2、 配制50×GSH还原酶:按GSH还原酶原液:GSH assay buffer =1:49的比例混合, 即为50×GSH还原酶。-20℃保存,3个月有效。  

3、 配制T-GSH检测工作液:按下表配制T-GSH检测工作液。

<strong>总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)</strong>

4、 配制蛋白沉淀工作液:在本试剂盒提供的0.5g蛋白沉淀剂中加入10ml ddH2O,配制 成10ml 5%的水溶液,即为蛋白沉淀工作液,4℃保存。  

5、 配制标准品:把还原型GSH标准储存液(10mM)用蛋白沉淀工作液稀释成50μM标准 溶液。然后依次稀释成6个点做标准曲线。

6、 准备样品:  

① 红细胞或血浆样品的制备:请尽量使用新鲜的血液进行测定。离心,沉淀为红细胞,上 清为血浆。对于红细胞,用PBS洗涤两次。取约5红细胞沉淀或血浆,加入蛋白沉淀工作液,充分Vortex振匀。4℃或冰浴放置,4℃离心,取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定,样品需暂时4℃保存备用。  

② 组织样品的制备:取组织用液氮速冻,迅速研磨,按每50mg加入150μl蛋白沉淀工 作液,充分Vortex振匀,再加入350μl蛋白沉淀工作液,用匀浆器充分匀浆。4℃孵育,离心,取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。  

③ 细胞样品的制备:PBS洗涤细胞1次,离心收集细胞,吸尽上清。加入细胞沉淀3倍 体积的蛋白沉淀工作液,充分Vortex振匀。(收集细胞前后分别对离心管进行称重,从而就可以计算出细胞沉淀的重量,10mg细胞沉淀的体积可以粗略地看做10ml。)对样品进行快速的冻融后,4℃或冰上孵育5min。离心取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。

7、 T-GSH加样操作:取96孔板,按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺 序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的T-GSH浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 

8、GSH检测:立即用酶标仪或自动生化分析仪于410nm处每隔2min检测一次,空白孔调零,共检测6min(亦可加入NADPH工作液反应6min后检测,只检测1次),以检测其反应速率ΔA/min。如果酶标仪不能检测410nm,可测定405~420nm处吸光度。

 

 

标签:总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)

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