总谷胱甘肽（T-GSH）检测试剂盒（DTNB速率比色法）
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中文名：总谷胱甘肽（T-GSH）检测试剂盒（DTNB速率比色法），供应商：上海远慕生物，规格：100T/50T,分类：氧化检测，保存：—20℃,避光,6个月，用途：检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽（T-GSH）含量。说明：比色法,显色底物与GSH反应,生成黄色化合物,分光光度法检测410nm处吸光度,进而计算出总谷胱甘肽（T-GSH）含量。
总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)简介
中文名：总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)
供应商：上海远慕
规格：100T/50T
分类：氧化检测
保存：—20℃,避光,6个月
用途：检测血浆、血清、组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。
说明：比色法,显色底物与GSH反应,生成黄色化合物,分光光度法检测410nm处吸光度,进而计算出总谷胱甘肽(T-GSH)含量。
适用范围：本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
上海远慕长期现货供应细胞培养，液体试剂，化学试剂，生化试剂，ELISA试剂盒，金标检测试剂盒，动物血清，标准品对照品，抗生素，维生素，溶液，染色液，缓冲液，蛋白质，细胞株，培养基，抗体，实验耗材，其他实验试剂等，了解更多试剂请来电我司销售人员！
总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)介绍：
谷胱甘肽(glutathione，GSH)存在于几乎身体的每一个细胞，参与细胞许多功能活动，是一种氧自由基消除剂。还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。
总谷胱甘肽(T-GSH)检测试剂盒(DTNB速率比色法)操作步骤：
1、 配制GSH标准储存液：取10mg还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH2O，溶 解并混匀，即为还原型GSH标准储存液(10mM)。一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
2、 配制50×GSH还原酶：按GSH还原酶原液：GSH assay buffer =1:49的比例混合， 即为50×GSH还原酶。-20℃保存，3个月有效。
3、 配制T-GSH检测工作液：按下表配制T-GSH检测工作液。
4、 配制蛋白沉淀工作液：在本试剂盒提供的0.5g蛋白沉淀剂中加入10ml ddH2O，配制 成10ml 5%的水溶液，即为蛋白沉淀工作液，4℃保存。
5、 配制标准品：把还原型GSH标准储存液(10mM)用蛋白沉淀工作液稀释成50μM标准 溶液。然后依次稀释成6个点做标准曲线。
6、 准备样品：
① 红细胞或血浆样品的制备：请尽量使用新鲜的血液进行测定。离心，沉淀为红细胞，上 清为血浆。对于红细胞，用PBS洗涤两次。取约5红细胞沉淀或血浆，加入蛋白沉淀工作液，充分Vortex振匀。4℃或冰浴放置，4℃离心，取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定，样品需暂时4℃保存备用。
② 组织样品的制备：取组织用液氮速冻，迅速研磨，按每50mg加入150μl蛋白沉淀工 作液，充分Vortex振匀，再加入350μl蛋白沉淀工作液，用匀浆器充分匀浆。4℃孵育，离心，取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。
③ 细胞样品的制备：PBS洗涤细胞1次，离心收集细胞，吸尽上清。加入细胞沉淀3倍 体积的蛋白沉淀工作液，充分Vortex振匀。(收集细胞前后分别对离心管进行称重，从而就可以计算出细胞沉淀的重量，10mg细胞沉淀的体积可以粗略地看做10ml。)对样品进行快速的冻融后，4℃或冰上孵育5min。离心取上清用于还原型谷胱甘肽(GSH)测定。
7、 T-GSH加样操作：取96孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺 序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的T-GSH浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
8、GSH检测：立即用酶标仪或自动生化分析仪于410nm处每隔2min检测一次，空白孔调零，共检测6min(亦可加入NADPH工作液反应6min后检测，只检测1次)，以检测其反应速率ΔA/min。如果酶标仪不能检测410nm，可测定405～420nm处吸光度。
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