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ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书

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ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书详细介绍,中文名:ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer),供应商:上海古朵,规格:100ml,分类:细胞组分分离,保存:4℃,12个月,用途:去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种。说明:无菌溶液。注意无菌操作,经过滤除菌处理。适用范围:限于科研,实验 ,不作临床。

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ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书详细介绍:

 

中文名:ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

供应商:上海古朵

规格:100ml

分类:细胞组分分离

保存:4℃,12个月

用途:去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种。

说明:无菌溶液。注意无菌操作,经过滤除菌处理。

适用范围:限于科研,实验 ,不作临床

<strong><strong><strong><strong>ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书</strong></strong></strong></strong>详细介绍

ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)使用说明:

1.取新鲜抗凝血,400~500g离心5min,离心弃上清。   

2.裂解: 加入6~10倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(特别提醒:对于鼠的血液,裂解1~2min已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4~5min,并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解)   

3.离心: 4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。   

4.如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。 

5.洗涤: 根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6.根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。 

注意: 对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,加入10倍血液体积的ACK Lysis Buffer进行第2步操作,并在4℃或室温裂解4~15min。对于鼠的血液,裂解4~5min已经足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。

 

ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书作用原理
细胞裂解液一般都用的是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专属的表面抗原,当裂解液中含可以攻击特定红细胞表面抗原的酶的时候 就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性,渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点) ,悬浮稳定性,这都是区别于其他种类细胞的区别点.红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的.另外红细胞裂解液不能达到100% 准确的裂解红细胞,总会或多或少导致其他种类细胞的裂解.

 


ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明书注意事项: 

1.制备细胞悬液是应根据具体实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。 

2.后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。

3.离心步骤尽量在4℃离心机上操作。 

4.对于常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。 

5.离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。   

6.经过ACK Lysis Buffer处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。

7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)说明:

对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。本裂解液经过滤除菌,经过ACK Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

 

标签:ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)ACK红细胞裂解液,红细胞裂解液

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