Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液
- 型 号：PS015
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上海远慕生物供应Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液上海远慕生物是一家集研发、销售为一体的高新技术生物企业，公司专注于生命科学和生物技术领域，专业提供分子生物学、免疫学、生命科学基础研究以及临床检测等诸多领域的试剂、耗材、仪器等各类产品及生物技术服务。
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抽提窍门
1：加溶液II（裂解液）后，操作一定要温和，剧烈混合会导致基因组DNA污染。 [5]
2：洗脱时60℃温育（Ellution Buffer）洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
3：若质粒提取含量低，可增加菌液样或换用ArtMedia Plasmid Culture，其比LB培养基质粒得量高
4：菌体应*悬浮 ， 如果没有*悬浮菌体，则残留的菌体团块在溶液 II 加入后，变成难以*裂解的团块。这个团块在溶液 III 加入后，会有一部分蛋白质继续存在于溶液中，成为蛋白质残留的最大根源。
5：加入溶液 II 后，混匀，体系最hao能立即变得清澈。体系如果变得清澈了，马上加入溶液 III 中和。
6：中和的操作 ，在 1.5ml 离心管中加入溶液 III 后，先颠倒两次，使管底朝上，用指头弹击管底数次，再颠倒混匀。效果非常好。
Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液 操作步骤
Ⅰ.使用质粒提取试剂盒提取质粒时请参考具体试剂盒的操作说明。如Omega公司的E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin [4] （质粒提取盒）。
Ⅱ.碱裂解手提法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下：
1：接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。
2：37℃振荡培养过夜。
3：取1.5ml菌体于Ep管(离心管)，以4000rpm离心3min，弃上清液。
4：加0.lml溶液I（1%葡萄糖，50mM/LEDTApH8.0，25mM/LTris-HClpH8.0）充分混合。
5：加入0.2ml溶液II（0.2mM/LNaOH，1%SDS），轻轻翻转混匀，置于冰浴5min.
6：加入0.15m1预冷溶液III（5mol/LKAc，pH4.8），轻轻翻转混匀，置于冰浴5min.
7：以10，000rpm离心20min，取上清液于另一新Ep管
8：加入等体积的异戊醇，混匀后静置10min.
9：以10，000rpm离心20min，弃上清。
10：用70%乙醇0.5ml洗涤一次，抽干所有液体。
11：待沉淀干燥后，溶于50ulTE缓冲液中（或60℃温育去离子水）
订购说明：
1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。
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3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日价格为准。
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5、请办理完货款后，将shou据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以chuan真、、等形式通知我们。
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